反應條件：

因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。

◇循環次數

根據模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環。

如果循環次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，則會出現Smear。

◇Anneal以及Extension

合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間(預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性，因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度，進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時，時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產物；Anneal溫度太低時，容易發生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成；而Extension時間太長時，會出現Smear。

實驗外包:

1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

反轉錄pcr試劑盒

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