菌落pcr試劑盒產品特點

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

反應條件：

因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。

◇循環次數

根據模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環。

如果循環次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，則會出現Smear。

◇Anneal以及Extension

合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間(預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性，因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度，進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時，時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產物；Anneal溫度太低時，容易發生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成；而Extension時間太長時，會出現Smear。

儲存條件：

僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1.血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地**。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

菌落pcr試劑盒

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